擔(dān)體和固定液的選擇一般根據(jù)所謂的“相似性原則”，即固定液的性質(zhì)與被分離組分之間的某些相似性，如官能團(tuán)、化學(xué)鍵、極性、某些化學(xué)性質(zhì)等，性質(zhì)相似時，兩種分子間的作用力就強(qiáng)，被分離組分在固定液中的溶解度就大，分配系數(shù)大，因而保留時間就長;反之溶解度小，分配系數(shù)小，因而能很快流出色譜柱。
擔(dān)體和固定液的要求：
1、揮發(fā)性小，操作溫度下有較低蒸氣壓，以免流失。
2、熱穩(wěn)定性好，操作溫度下不發(fā)生分解和聚合反應(yīng)，并且液體狀態(tài)，保持固定液原來的特性。
3、對試樣有一定的溶解能力，以免被測組分被帶走起不到分配作用。
4、具有良好的選擇性，即操作條件下，對沸點相近或者性質(zhì)相似的不同物質(zhì)有盡可能高的分離能力。
5、化學(xué)穩(wěn)定性好，不與被測組分，擔(dān)體，載氣發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
擔(dān)體和固定液在于保存細(xì)胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu)，固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對自身組織和細(xì)胞的自溶、抑制細(xì)菌和霉菌的生長。固定劑通過凝固、生成添加化合物等使蛋白質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，從而使酶失活。固定劑對細(xì)胞核細(xì)胞外成分發(fā)生物理改變。
固定液主要分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、酸鹽類固定液等，較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。組織細(xì)胞固定液主要由優(yōu)質(zhì)PFA、磷酸鹽、DEPC處理水組成，pH為7.4，適合于絕大多數(shù)組織和細(xì)胞的固定，尤其適用于與RNA有關(guān)實驗，它能較好的保護(hù)組織和細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)以及RNA。
微信公眾號
訪問手機(jī)端
